تم إنشاء العنصر الفاصل الطويل المتناثر العنصري-1 (L1) تقريبًا ثلثي جينوم الإنسان ويعمل كمصدر نشط للتنوع الوراثي والأمراض البشرية. ينتشر L1 عن طريق آلية تسمى النسخ العكسي المعكوس المستهدف (TPRT) ، حيث يقوم الإنزيم المشفر (ORF2p) بتقسيم الحمض النووي المستهدف لتحفيز النسخ العكسي للحمض النووي الخاص به أو للحمض النووي الريبوزي الذاتي أو غير الذاتي. هنا ، قمنا بتنقية ORF2p الكامل الطول وإعادة تكوين TPRT قوي بيولوجياً باستخدام الحمض النووي الريبوزي القالب وموقع الهدف. نقوم بتقديم هياكل المجهر الإلكتروني البارد لـ ORF2p البشري المرتبط بالحمض النووي الريبوزي القوالب المهيكلة وبدء تخليق cDNA. يتم التعرف على مسار البولي أدينوزين القالب بطريقة محددة للتسلسل بواسطة خمسة نطاقات متميزة. من بينها ، تقوم مجالات جديدة لربط الحمض النووي الريبوزي بثني الظهر القالب للسماح بالتشبث بساق شعر الحمض النووي الريبوزي مع القطعة القطبية البشرية لـ ORF2p. بالإضافة إلى ذلك ، تظهر الهياكل وإعادة التكوينات البيولوجية متطلبات غير متوقعة لموقع الهدف: يعتمد ORF2p على الحمض النووي الأحادي السلس المتقدم لتحديد موضع الدوبلكس المجاور في موقع النوكلياز النشط لتقسيم الشريط الأطول من الحمض النووي ، حيث يولد شق واحد كسرًا في الحمض النووي المتوالي. يوفر عملنا رؤى رئيسية حول آلية الانتقال المستمر في جينوم الإنسان ويعلم هندسة بروتينات الانتقال العكسي للجين.
الملخص
تم إنشاء العنصر الفاصل الطويل المتناثر العنصري-1 (L1) تقريبًا ثلثي جينوم الإنسان ويعمل كمصدر نشط للتنوع الوراثي والأمراض البشرية. ينتشر L1 عن طريق آلية تسمى النسخ العكسي المعكوس المستهدف (TPRT) ، حيث يقوم الإنزيم المشفر (ORF2p) بتقسيم الحمض النووي المستهدف لتحفيز النسخ العكسي للحمض النووي الخاص به أو للحمض النووي الريبوزي الذاتي أو غير الذاتي. هنا ، قمنا بتنقية ORF2p الكامل الطول وإعادة تكوين TPRT قوي بيولوجياً باستخدام الحمض النووي الريبوزي القالب وموقع الهدف. نقوم بتقديم هياكل المجهر الإلكتروني البارد لـ ORF2p البشري المرتبط بالحمض النووي الريبوزي القوالب المهيكلة وبدء تخليق cDNA. يتم التعرف على مسار البولي أدينوزين القالب بطريقة محددة للتسلسل بواسطة خمسة نطاقات متميزة. من بينها ، تقوم مجالات جديدة لربط الحمض النووي الريبوزي بثني الظهر القالب للسماح بالتشبث بساق شعر الحمض النووي الريبوزي مع القطعة القطبية البشرية لـ ORF2p. بالإضافة إلى ذلك ، تظهر الهياكل وإعادة التكوينات البيولوجية متطلبات غير متوقعة لموقع الهدف: يعتمد ORF2p على الحمض النووي الأحادي السلس المتقدم لتحديد موضع الدوبلكس المجاور في موقع النوكلياز النشط لتقسيم الشريط الأطول من الحمض النووي ، حيث يولد شق واحد كسرًا في الحمض النووي المتوالي. يوفر عملنا رؤى رئيسية حول آلية الانتقال المستمر في جينوم الإنسان ويعلم هندسة بروتينات الانتقال العكسي للجين.
معلومات الكاتب
أكانكشا ثاواني، ألفريدو خوسيه فلوريز أريزا، إيفا نوجاليس، كاثلين كولينز
يمكنك أيضًا البحث عن هؤلاء الكتاب في PubMed و google Scholar.
المراسلة إلى أكانكشا ثاواني، إيفا نوجاليس أو كاثلين كولينز.
معلومات إضافية
يحتوي هذا الملف على الشكل الإضافي 1 والجدول الإضافي 1. الشكل الإضافي 1: الجيالات غير المقطوعة للشكل 1c و 1d و 2c و 2g و 3d و 3f و 4b-e و Extended Data Figs. 1a و 1c و 1d و 5e و 7a و 7b و 8 و 10b. الجدول الإضافي 1: جميع تسلسلات الحمض النووي النووي المستخدمة في هذه الدراسة.
حقوق النشر والأذونات
إعادة الطبع والأذونات
حول هذه المقالة
استشهاد هذه المقالة
Thawani, A., Ariza, A.J.F., Nogales, E. et al. Template and target site recognition by human LINE-1 in retrotransposition. Nature (2023). https://doi.org/10.1038/s41586-023-06933-5
تنزيل الاقتباس
تم الحصول على هذا المحتوى من خلال مبادرة مشاركة المحتوى SharedIt من Springer Nature.
التعليقات
بتقديم تعليق ، فإنك توافق على الامتثال لشروطنا وإرشادات المجتمع. إذا وجدت شيئًا مسيئًا أو لا يتوافق مع شروطنا أو إرشاداتنا ، فيرجى الإبلاغ عنه كغير مناسب.
Source: https://www.nature.com/articles/s41586-023-06933-5
اترك تعليقاً